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021-54845833/15800441009
肝肌糖原含量檢測試劑盒
測定意義
糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖，是糖的主要的儲存形式之一，主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量，分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度，當血糖升高時可在肝臟合成糖原，血糖降低時，肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此，肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時，肌糖原不能直接分解成血糖，必須先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>
測定原理
蒽酮法。利用強堿性提取液提取糖原，在強酸性條件下利用蒽酮顯色劑測定糖原含量。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、濃硫酸（不允許快遞）和蒸餾水。
測定步驟
測定步驟
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至620nm，蒸餾水調(diào)零。
2、調(diào)節(jié)水浴鍋至95℃。
3、試劑二工作液的配制：在試劑二中倒入6mL蒸餾水，緩慢倒入24mL濃硫酸，充分溶解混勻后使用；用不完的試劑4℃保存一周；
4、加樣表（在EP管中反應(yīng)）：
預實驗的意義
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試劑（μL） |
空白管 |
標準管 |
測定管 |
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待測樣本 |
- |
- |
60 |
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試劑一 |
- |
60 |
- |
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蒸餾水 |
60 |
- |
- |
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試劑二工作液 |
240 |
240 |
240 |
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混勻，置95℃水浴10min（蓋緊，防止水分散失），冷卻，取200μL轉(zhuǎn)移至微量石英比色皿或96孔板中，于620nm波長處，分別讀取空白管、標準管和測定管吸光度，分別記為A1、A2和A3。 |
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預實驗的意義
比色法檢測試劑盒預實驗非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題，以便于及時作出調(diào)整；
5、通過3 - 5組預實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導實驗樣本稀釋比例。
注意
注意
正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定。
