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總膽汁酸含量試劑盒(酶循環(huán)比色法)試劑盒50管/48樣
測(cè)定意義
TBA由肝臟分解代謝，其血清濃度升高反映肝實(shí)質(zhì)性損傷。因此，TBA測(cè)定用于監(jiān)測(cè)慢性肝病價(jià)值很大。
測(cè)定原理
膽汁酸被3a-羥甾醇脫氫酶(3a-HSD)以及氧化型β-硫代煙酰胺脲嘌呤二核苷酸(Thio-NAD)特異性氧化，生成3-酮類(lèi)固醇以及還原型β-硫代煙酰胺脲嘌呤二核苷酸(Thio-NADH)。生成的3-酮類(lèi)固醇在3a-羥甾醇脫氫酶及還原型β-煙酰胺脲嘌呤二核苷酸(Thio-NADH)存在下，再生成膽汁酸及氧化型β-煙酰胺脲嘌呤二核苷酸(NAD)。如上所述循環(huán)放大使檢測(cè)靈敏度提高。測(cè)定在單位時(shí)間內(nèi)生成的還原型β-硫代煙酰胺脲嘌呤二核苷酸(Thio-NADH)在405nm.處的吸光度變化，以求得膽汁酸的含量。
需自備的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。
試劑的組成和配制
試劑一：液體10mLx1瓶，-20℃避光保存；
試劑一：2.5mL×1瓶，-20℃避光保存；
標(biāo)準(zhǔn)管：液體1mLx1支，4℃避光保存；濃度為1mmol/L。臨用前用蒸餾水稀釋至50μmol/L；
注意
正式測(cè)定前務(wù)必取 3 - 5 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
比色法檢測(cè)試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶(hù)的樣本檢測(cè)，以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)（比如低表達(dá)處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測(cè)定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問(wèn)題，以便于及時(shí)作出調(diào)整；
5、通過(guò)3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn)，判斷試劑盒對(duì)于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。
