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德氏乳桿菌保加利亞亞種(L.bulgaricus)核酸檢測試劑盒
預期用途
乳酸菌(lactic acid bacteria, LAB)是一類能通過發(fā)酵碳水化合物產生大量乳酸的革蘭氏陽性細菌的統(tǒng)稱，一類可發(fā)酵糖主要產生大量乳酸的細菌的通稱，不能液化明膠、不產生吲哚、革蘭氏陽性、無運動、無芽孢、觸酶陰性、硝酸還原酶陰性及細胞色素氧化酶陰性反應的細菌。乳酸菌廣泛存在于自然界(如土壤、植物表面)、動物腸道及發(fā)酵食品中，對人類健康和食品工業(yè)具有重要意義。乳酸菌并非單一物種，而是包含多個屬的菌群，常見的有：乳球菌屬(Lactococcus)、乳桿菌屬(Lactobacillus)、鏈球菌屬(Streptococcus)、腸球菌屬(Enterococcus)、片球菌屬(Pediococcus)等。乳酸菌是一種益生菌，其能夠將碳水化合物發(fā)酵成乳酸，因而得名。乳酸菌分布廣泛，通常存在于肉、乳和蔬菜等食品及其制品中。此外，乳酸菌也廣泛存在于人、畜、禽口腔、腸道和糞便等樣品中，其中，在人類和其他哺乳動物的口腔、陰道和腸道等環(huán)境中的乳酸菌，是構成特定區(qū)域正常微生物菌群的重要成員。本試劑盒適用檢測食品(肉、乳和蔬菜等食品及其制品)、人和動物的口腔、腸道、陰道分泌物、糞便及培養(yǎng)物等樣品中的德氏乳桿菌保加利亞亞種的 DNA，用于德氏乳桿菌保加利亞亞種感染的輔助診斷，其檢測結果僅供參考。本產品不提供活體樣品做陽性對照，僅提供人工合成的特異性 DNA片段標準品作為陽性對照，僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療用途。
檢驗原理
本試劑盒采用 TaqMan 探針法實時熒光 PCR 技術 ， 分別針對德氏乳桿菌保加利亞亞種(L.bulgaricus)高度保守區(qū)域設計特異性引物 ， 用熒光 PCR 技術對德氏乳桿菌保加利亞亞種(L.bulgaricus)的核酸進行體外擴增檢測，在反應體系中含德氏乳桿菌保加利亞亞種(L.bulgaricus)核酸模板的情況下，PCR 反應得以進行并釋放熒光信號，利用儀器對 PCR 過程中相應通道的信號強度進行實時監(jiān)測和輸出，實現(xiàn)檢測結果的定性、定量分析。
儲存條件及有效期
-20℃±5℃, 避光保存、運輸、反復凍融少于 7 次，有效期 12 個月。
適用儀器
1. 適應于大多數(shù)的 Real-time PCR 擴增儀 ，包括 ABI 、 Roche ， Bio-Rad ， Eppendorf，
MX3000P/3005P、LightCycler 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
2. 自備物品：無 DNA/RNA 酶的 1.5mL 離心管，0.2mL PCR 反應管，濾芯吸頭(規(guī)格:10μL，200
μL，1000μL)，離心機，振蕩混合器，各種規(guī)格的移液器。
質控標準
陰性質控品：無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示；
陽性質控品：擴增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值≤30；
以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。
產品性能指標
陰陽性參考品符合率：5 份陽性參考品符合率為 100％；5 份陰性參考品符合率為 100％。
精密度：批內、批間精密度檢測 Ct 值的變異系數(shù)（CV）均小于等于 3%。
檢測方法的局限性
樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關；
樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結果；
陽性對照、擴增產物泄漏，會導致假陽性結果；
病原體在流行過程中基因突變、重組，會導致假陰性結果；
