土壤磷酸二酯酶活性(熒光法)試劑盒微量法/48樣
測定原理
需自備的儀器和用品
試劑組成和配制
測定意義
土壤磷酸二酯酶是在土壤磷酸單酯酶之后的第二大磷酸酶,在土壤有機(jī)磷的循環(huán)代謝中起到重要作用。
測定原理
MUF在 355 nm波長處激發(fā), 能在 450 nm處檢測到熒光, 它與某些物 質(zhì)結(jié)合后熒光特性消失, 通過酶的水解作用MUF釋放出來, 通過檢測熒光量來表征酶活性。
需自備的儀器和用品
酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、黑色96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃避光保存(臨用前加入0.24mL試劑三溶解后加入11.76mL蒸餾水混勻);
試劑三:液體8mL×1瓶 ,常溫避光保存;
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,-20℃避光保存。
注意
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
注意
正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
比色法檢測試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測,以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)(比如低表達(dá)處理的樣本);
2、熟悉生化試劑盒的操作流程,尤其是初次使用生化試劑盒測定;
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適;
4、了解實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問題,以便于及時(shí)作出調(diào)整;
5、通過3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn),判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍,指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。
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