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021-54845833/15800441009
一氧化氮(NO)含量(硝酸還原酶法)試劑盒50管/48樣
測(cè)定原理
所需的儀器和用品
試劑盒組分與配制
測(cè)定意義
NO（Nitric Oxide，NO）廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中，特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細(xì)胞間及細(xì)胞內(nèi)的信息物質(zhì)，發(fā)揮信號(hào)傳遞的作用，是一種新型的生物信使分子，在機(jī)體的生理、病理過程中起著重要的作用。
測(cè)定原理
NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化變?yōu)橄跛猁}和亞硝酸鹽，通過硝酸鹽還原酶還原硝酸鹽為亞硝酸鹽后，在酸性條件下，亞硝酸鹽—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物，進(jìn)一步與萘基乙烯基二胺偶合，產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰，測(cè)定其吸光值，可以計(jì)算NO含量。
所需的儀器和用品
天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑盒組分與配制
提取液：液體55mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑x1支，-20℃避光保存。臨用前加入0.5mL蒸餾水
試劑二：粉劑x1支，-20℃避光保存。臨用前加入1mL蒸餾水
試劑三：液體30μLx1支，-20℃保存。，臨用前稀釋10倍，避免反復(fù)凍融
試劑四：液體1mLx1支，4℃避光保存。
試劑五：液體60μLx1支，-20℃保存。臨用前稀釋10倍，避免反復(fù)凍融
試劑六：液體3mL×1瓶，4℃避光保存。（如有析出，可以60℃加熱震蕩15min）
試劑七：液體3mL×1瓶，4℃避光保存。(用之前60℃加熱震蕩15min)
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mLx1支，4℃避光保存。(10μmol/mL 亞硝酸鈉)
注意
注意
正式測(cè)定前務(wù)必取 3 - 5 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
比色法檢測(cè)試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測(cè)，以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)（比如低表達(dá)處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測(cè)定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問題，以便于及時(shí)作出調(diào)整；
5、通過3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn)，判斷試劑盒對(duì)于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。
