測定意義

一氧化氮合成酶（NitricOxideSynthase，NOS，EC 1.14.13.39）是生物體內(nèi)催化L-精氨酸合成NO的一類酶，主要存在于血管平滑肌、巨噬細胞、內(nèi)皮細胞、神經(jīng)細胞、肝細胞、腎小球膜細胞等各種細胞中。NO作為細胞信息分子，在神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)中起著重要的調(diào)節(jié)作用。

根據(jù)其酶活性對鈣離子的依賴性不同，分為結(jié)構(gòu)型NOS（constitutiveNOS，cNOS）和損傷誘導(dǎo)型NOS（inducible NOS，iNOS），前者需要一定濃度的鈣離子方可激活，后者不依賴于外源鈣離子。

測定原理

NOS催化L-精氨酸、分子氧和NADPH，生成NO和NADP+，NO在水溶液中極易氧化生成NO2-和NO3-。在酸性條件下，NO2-與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物，進一步與萘基乙烯基二胺偶合，產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰，測定其吸光值，可以計算得到NOS活性大小。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。

試劑的組成和配制

試劑名稱	規(guī)格	保存條件	備注
提取液一	液體100mL×1	-20℃，保存
提取液二	液體1mL×3	-20℃，密封保存
緩沖液	液體20mL×1	2-8℃，保存
試劑一	粉劑×1	2-8℃，避光保存	臨用前加入15mL緩沖液溶解
試劑二	液體1.5mL×1	-20℃，避光保存
試劑三	粉劑×1	-20℃，避光保存	臨用前加1mL緩沖液溶解
試劑四	粉劑×1	-20℃，避光保存	臨用前加1mL緩沖液溶解
試劑五	液體×1	2-8℃，避光保存	如有析出，可適當加熱溶解
試劑六	液體×1	2-8℃，避光保存	用之前60℃加熱震蕩15min
標準品	液體	2-8℃，避光保存	10μmol/mL亞硝酸鈉

注意
正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。

預(yù)實驗的意義

比色法檢測試劑盒預(yù)實驗非常重要

1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達處理的樣本）；

2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；

3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；

4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題，以便于及時作出調(diào)整；

5、通過3 - 5組預(yù)實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實驗樣本稀釋比例。

021-54845833/15800441009

ELISA試劑盒

PCR試劑盒

生化試劑盒

農(nóng)殘檢測試劑盒

細胞庫

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

完全培養(yǎng)基

原代細胞

細胞專用培養(yǎng)基

細胞系

菌株

生化試劑

病理染色液

科研抗體

標準品

血清

形態(tài)病理檢測

分子病理

超微病理

細胞凋亡與檢測

產(chǎn)品中心

最新產(chǎn)品

相關(guān)文章

一氧化氮合成酶分型試劑盒100管/48樣