土壤β-木糖苷酶活性檢測試劑盒

測定意義

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體，是催化木聚糖類半纖維素降解的關(guān)鍵酶，產(chǎn)物木糖可作為碳源應用于微生物發(fā)酵。另外，β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應用于造紙工業(yè)，比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保，具有廣泛的應用價值。

測定原理

S-BXL分解4-MUF-β-D-木糖苷生成熒光物質(zhì)，通過測定熒光值升高速率來計算S-BXL活性。

自備用品

酶標儀、臺式離心機、恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、黑色96孔板和蒸餾水。

測定步驟

1、熒光酶標儀預熱30min以上，設置激發(fā)光波長 355 nm，測定波長 450nm。

2、加樣表

試劑名稱	測定管	空白管
震蕩條件下取勻待測液（μL）	200	-
蒸餾水（μL）	-	200
試劑二（μL）	200	200
混勻， 30℃避光振蕩反應3h后， 3000g 4℃離心3min，取上清液200μL于黑色96孔板中，檢測熒光值，激發(fā)波長355nm，發(fā)射波長450nm。熒光值分別為A測定A空白，計算ΔA=A測定管-A空白管。

預實驗的意義

比色法檢測試劑盒預實驗非常重要

1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達處理的樣本）；

2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；

3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；

4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題，以便于及時作出調(diào)整；

5、通過3 - 5組預實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應稀釋濃度范圍，指導實驗樣本稀釋比例。

注意

正式測定前務必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定。

ELISA試劑盒

PCR試劑盒