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總谷胱甘肽含量(熒光法)試劑盒微量法/48樣
測(cè)定原理
自備儀器和用品
測(cè)定意義
谷胱甘肽（Glutathione）是一種生物體內(nèi)廣泛存在的含硫醇三肽化合物，參與多種重要的生理過程，可保護(hù)細(xì)胞免遭氧化損傷，解除藥物代謝產(chǎn)物的毒性。
測(cè)定原理
GSH可以與單氯二胺反應(yīng)生成熒光物質(zhì)，所測(cè)熒光值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算GSH含量，加入還原試劑后，GSSG被還原成GSH，從而測(cè)定樣本中總的谷胱甘肽含量。
自備儀器和用品
低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、和蒸餾水、pH試紙、熒光酶標(biāo)儀（激發(fā)波長390nm，發(fā)射波長490nm）、恒溫箱。
試劑的組成和配制
生理鹽水：液體60ml×1瓶，4℃保存。
酸性提取液：液體10ml×1瓶，4℃保存。
堿性提取液：液體10ml×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體60ml×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×2支，-20℃避光保存。每支臨用前加入1.2mL蒸餾水混勻。未使用完的試
劑二可-20°C避光保存7天。
試劑三：粉劑×2支，-20℃避光保存。每支臨用前加入1.2mL蒸餾水混勻。未使用完的試劑三可-20°C避光保存7天。
試劑四：液體×1支，-20℃避光保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1瓶，-20℃避光保存。
黑色96孔酶標(biāo)板×1
注意
注意
正式測(cè)定前務(wù)必取 3 - 5 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
比色法檢測(cè)試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測(cè)，以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)（比如低表達(dá)處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測(cè)定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問題，以便于及時(shí)作出調(diào)整；
5、通過3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn)，判斷試劑盒對(duì)于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。
