測定原理

NADPH 氧化酶（NAO）是一個典型的膜蛋白，催化 NADPH 氧化生成 NADP+，并將電子傳遞給氧原子從而產生超氧陰離子。廣泛存在于動物、植物和真菌中。該酶異?？蓪е氯寺匀庋磕[?。℅CD），在植物中，該酶與其抗病性和各種脅迫有密切關系。

NADPH 氧化酶（NAO）將 NADPH 氧化為 NADP+的同時生成超氧陰離子(O2 .- )，接著與顯色劑反應生成水溶性的黃色物質。對照通過添加該酶的特異性抑制劑 DPI 排除背景值。最終檢測生成的有色物質在 450nm 處的吸光值，即可計算得出 NAO 酶活性大小。

所需的儀器和用品

酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、96孔板、研缽、冰、水浴鍋和蒸餾水。

試劑盒組分與配制

提取液：液體 60mL ×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 22mL ×1 支，-20℃保存；

試劑二：液體 0.6mL ×1 支，-20℃避光保存；

試劑三：粉體 ×2 支，-20℃避光保存；

試劑四：液體 3mL ×1 支，-20℃避光保存；

注意

正式測定前務必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定。

預實驗的意義

比色法檢測試劑盒預實驗非常重要

1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達處理的樣本）；

2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；

3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數是否合適；

4、了解實驗過程中可能出現的實驗現象或問題，以便于及時作出調整；

5、通過3 - 5組預實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應稀釋濃度范圍，指導實驗樣本稀釋比例。

ELISA試劑盒

PCR試劑盒