海藻糖含量(酶法)試劑盒100管/48樣
測定原理
自備儀器和用品
試劑的組成和配制
測定意義
海藻糖廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。由于海藻糖具有獨(dú)特的不同于其他碳水化合物的生物學(xué)特性,能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質(zhì)等惡劣環(huán)境下保護(hù)生物體細(xì)胞蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。
測定原理
通過海藻糖酶特異性水解海藻糖分解成兩分子葡萄糖,再用葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替比林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。
自備儀器和用品
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水
試劑的組成和配制
試劑一:液體0.55mLx1支,-20℃避光保存;
試劑二:液體 10ml×1瓶,-20℃避光保存;
試劑三:液體 10ml×1瓶,4℃避光保存;(若出現(xiàn)結(jié)冰現(xiàn)象,可37℃水浴溶解后使用)
標(biāo)準(zhǔn)品:0.6mg/mL海藻糖糖溶液5mL×1瓶,4℃避光保存;
注意
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
注意
正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
比色法檢測試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測,以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)(比如低表達(dá)處理的樣本);
2、熟悉生化試劑盒的操作流程,尤其是初次使用生化試劑盒測定;
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適;
4、了解實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問題,以便于及時(shí)作出調(diào)整;
5、通過3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn),判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍,指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。
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