測定意義

磷酸二酯酶（phosphodiesterase, PDEs）具有水解細(xì)胞內(nèi)第二信使（環(huán)磷酸腺苷或環(huán)磷酸鳥苷）的功能，降解細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷酸腺苷或磷酸鳥苷，從而終結(jié)這些第二信使所傳導(dǎo)的生化作用。

測定原理

磷酸二酯酶(PDEs)催化底物雙(4-硝基苯)磷酯（BNPP）分解生成黃色的產(chǎn)物 PNP，該產(chǎn)物在 405nm 處有最大吸收峰。通過檢測 PNP 在 405nm 下的增加速率，計算磷酸二酯酶（PDEs）的活性。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、生理鹽水、水浴鍋和蒸餾水。

試劑的組成

試劑一：粉劑×1瓶，-20℃避光保存。臨用前加入10mL試劑二溶解；

試劑二：液體30mL×1瓶，4℃保存；

試劑三：液體20mL×1瓶，4℃避光保存。

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1瓶， -20℃避光保存。

注意

正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。

預(yù)實驗的意義

比色法檢測試劑盒預(yù)實驗非常重要

1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達(dá)處理的樣本）；

2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；

3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；

4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題，以便于及時作出調(diào)整；

5、通過3 - 5組預(yù)實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實驗樣本稀釋比例。

ELISA試劑盒

PCR試劑盒