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總多酚含量檢測(cè)試劑盒96樣
測(cè)定意義
多酚(Polyphenol, or Phenolic compounds)，是一類(lèi)在植物體內(nèi)普遍存在的多元酚結(jié)構(gòu)的次生代謝物，廣泛存在于藥用植物、蔬菜和水果中。植物多酚的主要類(lèi)型包括簡(jiǎn)單的酚酸(如沒(méi)食子酸和香草酸)、黃酮類(lèi)(如黃酮、黃酮醇、兒茶素)、類(lèi)二苯乙烯、木酚素和聚合多酚類(lèi)物質(zhì)(如原花青素和單寧酸)。這些化合物在植物抵御紫外線輻射中起著重要作用，對(duì)食草動(dòng)物和微生物起到威懾或拮抗作用，在植物生長(zhǎng)、成熟等過(guò)程中也起著信號(hào)分子的作用。大量研究表明，很多酚類(lèi)化合物具有抗氧化、抗微生物、抗癌、抗炎等多種作用，可用于預(yù)防心血管疾病、癌癥、糖尿病以及與氧化應(yīng)激有關(guān)的疾病。多酚廣泛存在于植物中，檢測(cè)其含量有助于更好地利用植物資源，同時(shí)可以進(jìn)一步探索其在醫(yī)藥、保健等領(lǐng)域的應(yīng)用潛力。
測(cè)定原理
多酚分子中的酚羥基（-OH）在福林酚試劑的作用下被氧化生成藍(lán)色化合物，產(chǎn)物在778nm處具有特征吸收峰，通過(guò)吸光值變化即可定量檢測(cè)茶多酚的含量。沒(méi)食子酸當(dāng)量(Gallic acid equivalent, GAE)是一種用于量化樣品中多酚含量的標(biāo)準(zhǔn)方法，即以沒(méi)食子酸作為標(biāo)準(zhǔn)品，通過(guò)比較其含量來(lái)計(jì)算其它多酚的含量。
自備儀器和用品
酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、50目篩、研缽、烘箱、蒸餾水、超聲清洗機(jī)、臺(tái)式離心機(jī)。
試劑清單
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
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試劑名稱(chēng) |
規(guī)格 |
數(shù)目 |
貯藏 |
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提取液 |
液體120mL |
x1 |
4℃ |
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試劑一 |
液體8mL |
x1 |
4℃,避光 |
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試劑二 |
液體8mL |
x1 |
4℃ |
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標(biāo)準(zhǔn)品 |
粉劑 |
x1 |
4℃,避光 |
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
比色法檢測(cè)試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測(cè)，以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)（比如低表達(dá)處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測(cè)定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問(wèn)題，以便于及時(shí)作出調(diào)整；
5、通過(guò)3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn)，判斷試劑盒對(duì)于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。
