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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性檢測試劑盒
測定意義
測定意義
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性是土壤碳 - 氮循環(huán)效率、微生物功能、肥力水平、生態(tài)健康及病蟲害防控潛力的綜合生物標(biāo)志物，其測定不僅能揭示土壤內(nèi)部養(yǎng)分循環(huán)的規(guī)律，還能為農(nóng)業(yè)氮素管理、綠色防控、生態(tài)環(huán)境監(jiān)測與修復(fù)提供精準(zhǔn)的量化依據(jù)，是土壤酶學(xué)研究中與纖維二糖酶同等重要的核心檢測指標(biāo)。
測定原理
S-NAG分解4-MUF-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷，產(chǎn)生熒光物質(zhì)，通過測定熒光值升高速率來計算S-NAG活性。
自備用品
酶標(biāo)儀、臺式離心機、恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、黑色96孔板和蒸餾水。
測定步驟
測定步驟
1、熒光酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，設(shè)置激發(fā)光波長 355 nm，測定波長 450nm。
2、加樣表
預(yù)實驗的意義
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試劑名稱 |
測定管 |
空白管 |
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震蕩條件下取勻待測液（μLL） |
200 |
- |
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蒸餾水（μL） |
- |
200 |
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試劑二（μL） |
200 |
200 |
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混勻， 30℃避光振蕩反應(yīng)3h后， 3000g 4℃離心3min，取上清液200μL于黑色96孔板中，檢測熒光值，激發(fā)波長355nm，發(fā)射波長450nm。熒光值分別為A測定管，A空白管，計算ΔA=A測定管-A空白管。 |
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預(yù)實驗的意義
比色法檢測試劑盒預(yù)實驗非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題，以便于及時作出調(diào)整；
5、通過3 - 5組預(yù)實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實驗樣本稀釋比例。
注意
注意
正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。
