柯薩奇病毒A6型/A10型/A16型/腸道病毒/腸道病毒71型雙管五重探針法qRT-PCR試劑盒

產(chǎn)品及特點(diǎn)

柯薩奇病毒A組(Coxsackievirus A Group，CVA)屬于小RNA病毒科腸道病毒屬，為正義單鏈RNA病毒，基因組全長約為7400 nt?？滤_奇病毒A組有24 個血清型，其中，A6型，A10型和A16型的柯薩奇病毒已經(jīng)成為手足口病重要病原體。腸道病毒（Enterovirus）是一類單股正鏈RNA病毒，基因組7200 bp到 8500 bp左右，屬于小顆粒病毒科。它們主要感染人類，引發(fā)手足口病、脊髓灰質(zhì)炎和心肌炎等，給人類的健康造成了極大危害。腸道病毒71型（Enterovirus 71，EV71）是基因組約為7400 bp的單股正鏈RNA病毒，是引起手足口病的重要病原體之一。還能引起無菌性腦膜炎、腦干腦炎和脊髓灰質(zhì)炎樣的麻痹等多種與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的疾病。上述病毒給人類的健康造成極大的危害。因此對其快速檢測具有重要意義。本產(chǎn)品就是以探針法qRT-PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的相關(guān)試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。

2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，分析靈敏度高，可以達(dá)到100拷貝/反應(yīng)。

3. 提供陽性對照，便于排除假陰性結(jié)果。

4. 特異性高，引物和探針分別根據(jù)和柯薩奇病毒RNA A6型、A10型和A16型，腸道病毒71型和腸道病毒RNA高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會跟其他生物的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。

5. 既可用于定性檢測，又可用于定量檢測，但不推薦用于定量。

6. 兩管五重設(shè)計(jì)，一管反應(yīng)用于檢測柯薩奇病毒A6 /A10 /A16型，一管用于檢測腸道病毒和腸道病毒71型。

7. 本產(chǎn)品足夠50次20 μL體系的兩管五重探針法RT-PCR反應(yīng)。

8. 本產(chǎn)品只能用于科研。

規(guī)格及成分

成分

規(guī)格

包裝

探針法qRT-PCR緩沖液

500μL×2

0.5mL藍(lán)蓋管

探針法qRT-PCR酶混合液v2

100μL×2

0.5mL紅蓋管

熒光PCR專用模板稀釋液

1mL

1.5mL綠蓋管

柯薩奇病毒A6型/A10型/A16型三重RT-PCR引物-探針干粉

50次

0.5mL棕色管

柯薩奇病毒A10型陽性對照（1E4拷貝/μL）

50次

0.5mL棕色管

柯薩奇病毒A10型陽性對照（1E4拷貝/μL）

50次

0.5mL棕色管

柯薩奇病毒A16型陽性對照（1E4拷貝/μL）

50μL

0.5 mL黃蓋管

使用手冊

1份

第一部分，編號15-15575-5-pt1，10孔盒包裝

成分	規(guī)格	包裝
腸道病毒和腸道病毒71型RT-PCR引物-探針干粉	50次	0.5mL棕色管
腸道病毒71型陽性對照(1E4拷貝/μL)	50μL	0.5mL黃蓋管
腸道病毒陽性對照(1E4拷貝/μL)	50μL	0.5 mL白蓋管
使用手冊	1份	1份

第二部分，編號15-15575-5-pt2，5孔盒包裝

注意：引物-探針干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入165mL的超純水充分混勻后再使用，未用完的需要-20℃保存。

使用方法

稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品

1. 如果有N個樣品，設(shè)置N+6個提取，多出的一個是提取陰性對照，樣本為不含有要檢測的5種病毒的樣本。多出的另外5個是分別含有5種病毒之一的提取陽性對照。

2. 用自選方法純化樣品的RNA（含內(nèi)參），本試劑盒跟市場上大多數(shù)RNA提取試劑盒兼容。

設(shè)置兩管5重探針法RT-PCR反應(yīng)20 μL體系

3. 對上步提取得到的N+6個核酸樣本，設(shè)置（N+6）+6個RT-PCR反應(yīng)，多出的6個中1個是RT-PCR陰性對照，另外5個分別是5種病毒的擴(kuò)增陽性對照。

數(shù)據(jù)處理

1. 5個擴(kuò)增陽性對照或5個樣本制備陽性對照中的任何一個結(jié)果為陰性（即在其所對應(yīng)的熒光通道的Ct大于40或沒有Ct值），則整個擴(kuò)增或制備實(shí)驗(yàn)無效，不需要分析數(shù)據(jù)，需要重做擴(kuò)增或制備或跟廠家聯(lián)系。如果任何一個擴(kuò)增陰性對照或制備陰性對照結(jié)果為陽性（上表中所用熒光通道任何一個為陽性均算），說明環(huán)境污染，則整個擴(kuò)增或制備實(shí)驗(yàn)無效，不需要分析數(shù)據(jù)，需要跟廠家聯(lián)系。

2. 如果陰性對照和陽性對照正常，則實(shí)驗(yàn)有效，可以進(jìn)入后續(xù)分析。

3. 對第1組樣本，如果FAM通道的Ct大于或等于40則為柯薩奇病毒A6陰性，如果小于或等于40則為陽性。如果HEX通道的Ct大于或等于40則為柯薩奇病毒A10陰性，如果小于或等于40則為陽性。如果Cy5通道的Ct大于或等于40則為柯薩奇病毒A16陰性，如果小于或等于40則為陽性。

4. 對第2組樣本，如果FAM通道的Ct大于或等于40則為腸道病毒陰性，如果小于或等于40則為陽性。如果Cy5通道的Ct大于或等于40則為腸道病毒71型陰性，如果小于或等于40則為陽性。

自備試劑
樣品RNA，超純水

運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期2年

021-54845833/15800441009

ELISA試劑盒

PCR試劑盒

生化試劑盒

農(nóng)殘檢測試劑盒

細(xì)胞庫

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

完全培養(yǎng)基

原代細(xì)胞

細(xì)胞專用培養(yǎng)基

細(xì)胞系

菌株

生化試劑

病理染色液

科研抗體

標(biāo)準(zhǔn)品

血清

形態(tài)病理檢測

分子病理

超微病理

細(xì)胞凋亡與檢測

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