產(chǎn)品及特點(diǎn)
本產(chǎn)品是基于熒光探針檢測(cè)的即用型RT-PCR試劑盒，可以對(duì)靶RNA分子進(jìn)行實(shí)時(shí)定量RT-PCR分析（quantitative RT-PCR、qRT-PCR）。產(chǎn)品含有經(jīng)過(guò)優(yōu)化的緩沖液組分、逆轉(zhuǎn)錄酶、熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶、Taq DNA穩(wěn)定劑、dNTPs、MgCl2和穩(wěn)定劑等所有實(shí)時(shí)定量RT-PCR所需要的成分，用戶(hù)只需加入RNA模板、引物和探針即可進(jìn)行探針?lè)▽?shí)時(shí)定量RT-PCR反應(yīng)，具有廣泛的用途。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 以2×Mix提供，用戶(hù)只需準(zhǔn)備模板、引物、探針和ROX染料（取決于qPCR儀器）即可以進(jìn)行探針?lè)▽?shí)時(shí)定量RT-PCR實(shí)驗(yàn)，非常方便快捷，降低了操作誤差。
2. 各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，反應(yīng)的靈敏度高，特異性強(qiáng)。靈敏度最高時(shí)可以達(dá)到50拷貝/反應(yīng)（跟模板質(zhì)量，引物設(shè)計(jì)等相關(guān)）。
3. 既可用于TaqMan探針qRT-PCR，也可以是分子信標(biāo)（molecular beacon）的qRT-PCR。
4. 靈敏度和專(zhuān)一性比染料法熒光定量RT-PCR更高。
5. 可用于基因表達(dá)分析、SNP分析、拷貝數(shù)分析等實(shí)驗(yàn)。也可以用于定性檢。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研，1 mL足夠100次20 μL體系的探針?lè)╭RT-PCR反應(yīng)。
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成分
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規(guī)格
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包裝
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探針?lè)?/span>qRT-PCR緩沖液
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500μL
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0.5mL藍(lán)蓋管
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探針?lè)?/span>qRT-PCR酶混合液
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100μL
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0.5mL紅蓋管
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使用手冊(cè)
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1份
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1份
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝
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使用方法
如果有N個(gè)樣品并且做定量分析，最好設(shè)置N+7個(gè)反應(yīng)，多出的7個(gè)中，6個(gè)是做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的陽(yáng)性對(duì)照，一個(gè)是陰性對(duì)照（NC）。在N+7個(gè)PCR管中，加入下列成分。如果是做定性分析，則6個(gè)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的樣品縮減成一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照（PC），用戶(hù)自己需要根據(jù)下表進(jìn)行適當(dāng)修改（把6個(gè)標(biāo)曲反應(yīng)改成1個(gè)陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng)）。
注，下列信息僅供參考，具體以qPCR儀器的使用手冊(cè)為準(zhǔn)
1、不需要ROX的機(jī)型：AgilentMX3000和MX4000、iCycler IQ、LightCycler 480、SmartCycler System、Thermal Cycler Dice RealTime System等型號(hào)的熒光PCR儀器不需要加ROX染料，但加入的話(huà)也不會(huì)影響整個(gè)PCR分析
2、需要使用ROXI的機(jī)型：ABIPrism7000、7300、7700、7900HT、Step One、Step One Plus。
3、需要使用ROXII的機(jī)型：ABIPrism7500、7500Fast、MJ Opticon、MJ Chromo4、CorbettRotorGene3000。
如果把本試劑盒用于定量檢測(cè)，則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的log值為橫軸，以Ct值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。再以待測(cè)樣品的Ct值從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上推算出樣品DNA濃度的log值，再推算出其濃度。如果把本試劑盒用于定性檢測(cè)，只判斷陽(yáng)性或陰性。一般情況下，陰性對(duì)照Ct大于或等于40（閾值需要以陰性對(duì)照的Ct值確定，此處為便于敘述以40為例，具體情況很可能閾值不一樣）。陽(yáng)性2. 對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng)，有典型擴(kuò)增曲線(xiàn)，Ct值應(yīng)該小于或等于30。對(duì)待測(cè)樣品，如果其Ct大于或等于40則為陰性，如果小于或等于35則為陽(yáng)性。如果在35-40之間，則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的Ct值如果大于或等于40則為陰性，如果小于40，則為陽(yáng)性。
自備試劑
RNA模板、引物、TaqMan探針、超純水
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期1年
購(gòu)物車(chē)
幫助
021-54845833/15800441009
